השוואה מפורטת זו בוחנת את ההבדלים הבסיסיים בין פולימראזות RNA ו-DNA, האנזימים העיקריים האחראים על שכפול וביטוי גנטי. בעוד ששניהם מזרזים את היווצרותן של שרשראות פולינוקלאוטידים, הם נבדלים באופן משמעותי בדרישות המבניות שלהם, ביכולות תיקון השגיאות ובתפקידים הביולוגיים שלהם בתוך הדוגמה המרכזית של התא.
הדגשים
RNA פולימראז מסנתז RNA דה נובו ללא צורך בפריימר.
DNA פולימראז דורש פריימר אך מציע הגהה מעולה לדיוק גבוה.
התוצר הסופי של RNA פולימראז הוא חד-גדילי, בעוד ש-DNA פולימראז מייצר סליל כפול.
ל-RNA פולימראז יש יכולות פירוק DNA פנימיות שחסרות ל-DNA פולימראז.
מה זה RNA פולימראז?
האנזים האחראי על תעתוק DNA לסוגים שונים של מולקולות RNA במהלך ביטוי גנים.
תפקיד עיקרי: שעתוק RNA
סובסטרט: ריבונוקלאוזידי טריפוספטים (NTPs)
דרישת פריימר: אין (סינתזה דה נובו)
סוגים עיקריים: Pol I, Pol II ו- Pol III (באאוקריוטים)
תוצר: RNA חד-גדילי
מה זה DNA פולימראז?
האנזים שתפקידו לשכפל את הגנום של התא כדי להבטיח תורשה גנטית מדויקת במהלך החלוקה.
סוגים עיקריים: Pol I, II, III, IV ו-V (בפרוקריוטים)
מוצר: DNA דו-גדילי
טבלת השוואה
תכונה
RNA פולימראז
DNA פולימראז
תהליך ביולוגי
תַעֲתוּק
שכפול
תבנית בשימוש
DNA דו-גדילי
DNA חד-גדילי
נדרש פריימר
לֹא
כֵּן
יכולת הגהה
מינימלי/מוגבל
נרחב (אקסונוקלאז 3' עד 5')
סוכר במוצר
ריבוז
דאוקסיריבוזה
פעילות מרגיעה
יכולת טבועה דמוית הליקאז
דורש אנזים הליקאז נפרד
שיעור שגיאות
1 מתוך 10,000 נוקלאוטידים
1 מתוך 1,000,000,000 נוקלאוטידים
מבנה המוצר הסופי
גדיל פולינוקלאוטיד יחיד
סליל דו-גדילי
השוואה מפורטת
דרישות התחלה ופריימר
הבדל עיקרי טמון באופן שבו אנזימים אלה מתחילים סינתזה. RNA פולימראז יכול ליזום יצירת גדיל חדש מאפס ברגע שהוא נקשר לרצף פרומוטר. לעומת זאת, DNA פולימראז אינו מסוגל להתחיל שרשרת ודורש פריימר קיים מראש עם קבוצת 3'-OH פנויה כדי להוסיף את הנוקלאוטיד הראשון.
דיוק והגהה
DNA פולימראז שומר על שלמות הגנום כולו, מה שמצריך שיעור שגיאות נמוך במיוחד המושג באמצעות מנגנוני הגהה מובנים. RNA פולימראז חסר פעילות אקסונוקלאז גבוהה זו, וכתוצאה מכך שיעור מוטציות גבוה משמעותית. עם זאת, מכיוון ש-RNA הוא חולף ואינו עובר בתורשה, שגיאות אלו בדרך כלל פחות מזיקות לאורגניזם.
פונקציות פריקה מבניות
במהלך התעתוק, RNA פולימראז פועל כמכונה עצמאית שיכולה לפתוח את הסליל הכפול של ה-DNA בעצמה כדי לגשת לתבנית. DNA פולימראז תלוי יותר בקומפלקס של חלבונים, ודורש באופן ספציפי מהאנזים הליקאז לשבור קשרי מימן ולפתוח את מזלג השכפול שלפניו.
ספציפיות המצע
האנזימים סלקטיביים מאוד לגבי אבני הבניין שהם משתמשים בהן. RNA פולימראז משלב ריבונוקלאוטידים המכילים סוכר ריבוז ואת הבסיס אורציל. DNA פולימראז בוחר באופן ספציפי דאוקסיריבונוקלאוטידים, הכוללים סוכר דאוקסיריבוז ותימין במקום אורציל.
יתרונות וחסרונות
RNA פולימראז
יתרונות
+ייזום עצמאי
+תמלול מהיר
+התפרקות DNA פנימית
+סוגי RNA מרובים
המשך
−שיעור שגיאות גבוה יותר
−חסרה הגהה חזקה
−יציבות נמוכה יותר
−מוצרים חולפים
DNA פולימראז
יתרונות
+דיוק קיצוני
+הגהה חזקה
+אחסון גנטי קבוע
+תהליכיות גבוהה
המשך
−דורש פריימר
−דורש אנזימים מסייעים
−התחלה איטית יותר
−מסלולי תיקון מורכבים
תפיסות מוטעות נפוצות
מיתוס
RNA פולימראז ו-DNA פולימראז פועלים באותה מהירות.
מציאות
ברוב האורגניזמים, DNA פולימראז מהיר משמעותית, ונע בכ-1,000 נוקלאוטידים לשנייה בחיידקים, בעוד ש-RNA פולימראז נע בממוצע קרוב יותר ל-40-80 נוקלאוטידים לשנייה. הבדל זה משקף את קנה המידה העצום של שכפול גנום שלם לעומת תעתוק גנים ספציפיים.
מיתוס
יש רק סוג אחד של RNA פולימראז בכל התאים.
מציאות
בעוד שלחיידקים יש בדרך כלל RNA פולימראז אחד מרוב תת-יחידות, לאאוקריוטים יש לפחות שלושה סוגים שונים. כל RNA פולימראז אאוקריוטי מתמחה במשימות שונות, כגון סינתזה של RNA ריבוזומלי, RNA שליח או RNA transfer.
מיתוס
DNA פולימראז יכול לתקן שגיאות רק במהלך השכפול.
מציאות
מגוון פולימראזות DNA ייעודיות קיימות אך ורק כדי לתקן נזקים לאורך חיי התא. אנזימים אלה יכולים למלא פערים הנגרמים על ידי אור UV או חשיפה לכימיקלים, ופועלים באופן עצמאי ממחזור השכפול הראשי.
מיתוס
RNA פולימראז מייצר RNA דו-גדילי.
מציאות
RNA פולימראז יוצר באופן ספציפי מולקולה חד-גדילית על ידי קריאת אחד בלבד משני גדילי תבנית ה-DNA. בעוד שחלק מה-RNA יכול להתקפל חזרה על עצמו וליצור מבנים דו-גדיליים מקומיים, הפלט העיקרי הוא שרשרת פולינוקלאוטידים אחת.
שאלות נפוצות
האם DNA פולימראז יכול להתחיל גדיל חדש ללא עזרה?
לא, DNA פולימראז לא יכול ליזום סינתזה בעצמו מכיוון שהוא דורש קבוצת 3'-OH קיימת מראש כדי לחבר את הנוקלאוטיד הנכנס. בטבע, אנזים הנקרא פרימאז יוצר פריימר RNA קצר המספק נקודת התחלה זו. ברגע שהפריימר נמצא במקומו, DNA פולימראז יכול להתחיל להאריך את השרשרת.
איזה אנזים מדויק יותר ומדוע?
DNA פולימראז מדויק הרבה יותר, עם שיעור שגיאה נמוך פי 100,000 בערך מזה של RNA פולימראז. דיוק גבוה זה נובע מפעילות האקסונוקלאז שלו ב-3' עד 5', המאפשרת לו "לעבור אחורה" ולהסיר בסיסים מזווגים בצורה שגויה. RNA פולימראז חסר הגהה קפדנית זו מכיוון שמספר קטן של מולקולות RNA פגומות פחות קטסטרופליות ממוטציה קבועה בגנום.
האם RNA פולימראז זקוק להליקאז כדי לפתוח DNA?
בניגוד ל-DNA פולימראז, RNA פולימראז אינו דורש אנזים הסליקאז נפרד כדי לפתוח את סליל ה-DNA. יש לו מנגנון פנימי המאפשר לו להתיר את תבנית ה-DNA כשהיא נעה לאורך הגן. זה יוצר מה שמכונה בועת שעתוק, אשר נעה עם האנזים.
מה קורה אם RNA פולימראז עושה טעות?
אם מתרחשת שגיאה במהלך התעתוק, היא גורמת למולקולת RNA פגומה וייתכן גם לחלבון שאינו מתפקד. עם זאת, מכיוון שגן בודד מתועתק פעמים רבות, לתא בדרך כלל יש עותקים נכונים רבים אחרים של החלבון. ה-RNA הפגום מתפרק בסופו של דבר, כך שהשגיאה אינה הופכת לחלק קבוע מהקוד הגנטי של האורגניזם.
מדוע DNA פולימראז משתמש בתימין בעוד RNA פולימראז משתמש באורציל?
השימוש בתימין ב-DNA הוא אמצעי הגנה אבולוציוני מפני מוטציה. ציטוזין יכול להפוך באופן ספונטני לאורציל; אם ה-DNA היה משתמש באורציל באופן טבעי, התא לא היה מסוגל לדעת אם אמור היה להיות שם בסיס אורציל או שמא מדובר בציטוזין פגום. באמצעות שימוש בתימין ב-DNA, התא יכול לזהות ולתקן בקלות כל אורציל שמופיע, תוך שמירה על שלמות גנטית.
מהם שלושת סוגי הפולימראזות של RNA אאוקריוטיות?
איקריוטים משתמשים ב-RNA פולימראז I לסינתזה של רוב ה-RNA הריבוזומלי (rRNA), ב-RNA פולימראז II עבור RNA שליח (mRNA) וכמה RNA קטנים, וב-RNA פולימראז III עבור RNA העברה (tRNA) ו-RNA מבניים קטנים אחרים. כל אנזים מזהה רצפי פרומוטר ספציפיים ודורש גורמי שעתוק שונים כדי לתפקד. התמחות זו מאפשרת ויסות מורכב יותר של ביטוי גנים.
האם RNA פולימראז יכול לנוע בשני הכיוונים?
לא, גם פולימראזות RNA וגם פולימראזות DNA הן חד כיווניות לחלוטין, ומסנתזות גדילים חדשים רק בכיוון 5' ל-3'. משמעות הדבר היא שהן קוראות את גדיל התבנית בכיוון 3' ל-5'. אילוץ כיווני זה נובע מהמנגנון הכימי של התגובה, הדורש מקבוצת ההידרוקסיל 3' של השרשרת הקיימת לתקוף את קבוצת הפוספט של הנוקלאוטיד הנכנס.
האם DNA פולימראז מעורב בתעתוק?
לא, DNA פולימראז מעורב באופן בלעדי בשכפול DNA ובתיקון DNA. הוא אינו ממלא תפקיד בתהליך התעתוק, שהוא התחום של RNA פולימראז. שני האנזימים נבדלים זה מזה במבנה שלהם וביכולתם לזהות אותות התחלה שונים על מולקולת ה-DNA.
איך האנזימים האלה יודעים מאיפה להתחיל?
RNA פולימראז מזהה רצפי DNA ספציפיים הנקראים פרומוטורים, אשר מסמנים את תחילתו של גן. DNA פולימראז, לעומת זאת, מתחיל במקומות ספציפיים הנקראים "מקורות שכפול". בעוד ש-RNA פולימראז מוצא את נקודת ההתחלה שלו בעזרת גורמי שעתוק, DNA פולימראז חייב להמתין עד שפרימאז יניח פריימר במזלג השכפול.
איזה אנזים משמש ב-PCR (תגובת שרשרת פולימראזית)?
PCR משתמש ב-DNA פולימראז, ספציפית גרסה יציבה בחום כמו פולימראז Taq שמקורו בחיידקים תרמופיליים. זה מאפשר לאנזים לשרוד את הטמפרטורות הגבוהות הנדרשות כדי לדנטורציה של גדילי DNA במהלך תהליך המחזור. RNA פולימראז אינו משמש ב-PCR סטנדרטי, אם כי הוא משמש בטכניקות אחרות כמו שעתוק חוץ גופי.
פסק הדין
בחרו ב-RNA פולימראז כמוקד בחקר מסלולי ביטוי גנים וסינתזת חלבונים. בחרו ב-DNA פולימראז בחקר מנגנוני חלוקה תאית, תורשה ויציבות גנטית ארוכת טווח.