See detailne võrdlus uurib RNA ja DNA polümeraaside, geneetilise replikatsiooni ja ekspressiooni eest vastutavate peamiste ensüümide, põhilisi erinevusi. Kuigi mõlemad katalüüsivad polünukleotiidahelate moodustumist, erinevad nad oluliselt oma struktuuriliste nõuete, veaparandusvõime ja bioloogilise rolli poolest raku keskses dogmas.
Esiletused
RNA polümeraas sünteesib RNA-d de novo ilma praimerit vajamata.
DNA polümeraas vajab praimerit, kuid pakub suurepärast korrektuuri kõrge täpsuse saavutamiseks.
RNA polümeraasi lõpp-produkt on üheahelaline, samas kui DNA polümeraas tekitab topeltheeliksi.
RNA polümeraasil on DNA lahtikeeramise võime, mis DNA polümeraasil puudub.
Mis on RNA polümeraas?
Ensüüm, mis vastutab DNA transkriptsiooni eest erinevat tüüpi RNA molekulideks geeniekspressiooni ajal.
Peamine funktsioon: RNA transkriptsioon
Substraat: Ribonukleosiidtrifosfaadid (NTP-d)
Praimeri nõue: Puudub (de novo süntees)
Peamised tüübid: Pol I, Pol II ja Pol III (eukarüootides)
Toode: üheahelaline RNA
Mis on DNA polümeraas?
Ensüüm, mille ülesandeks on raku genoomi replikatsioon, et tagada täpne geneetiline pärandumine jagunemise ajal.
Peamine funktsioon: DNA replikatsioon ja parandamine
Peamised tüübid: Pol I, II, III, IV ja V (prokarüootides)
Toode: kaheahelaline DNA
Võrdlustabel
Funktsioon
RNA polümeraas
DNA polümeraas
Bioloogiline protsess
Transkriptsioon
Replikatsioon
Kasutatud mall
Kaheahelaline DNA
Üheahelaline DNA
Vajalik kruntvärv
Ei
Jah
Korrektuurivõime
Minimaalne/Piiratud
Ulatuslik (3' kuni 5' eksonukleaas)
Suhkur tootes
Riboos
Deoksüriboos
Lõdvestumise tegevus
Loomupärane helikaasilaadne võime
Nõuab eraldi helikaasi ensüümi
Vea määr
1 10 000 nukleotiidi kohta
1 1 000 000 000 nukleotiidi kohta
Lõpptoote struktuur
Üksik polünukleotiidne ahel
Kaheahelaline spiraal
Üksikasjalik võrdlus
Algatamise ja ettevalmistamise nõuded
Peamine erinevus seisneb selles, kuidas need ensüümid sünteesi alustavad. RNA polümeraas saab algatada uue ahela loomise nullist, kui see seondub promootorjärjestusega. Seevastu DNA polümeraas ei suuda ahelat alustada ja vajab esimese nukleotiidi lisamiseks olemasolevat praimerit vaba 3'-OH rühmaga.
Täpsus ja korrektuur
DNA polümeraas säilitab kogu genoomi terviklikkuse, mis nõuab sisseehitatud korrektuurimehhanismide abil saavutatavat uskumatult madalat veamäära. RNA polümeraasil puudub see kõrge täpsusega eksonukleaasi aktiivsus, mille tulemuseks on oluliselt kõrgem mutatsioonimäär. Kuna RNA on aga mööduv ja mitte päritav, on need vead organismile üldiselt vähem kahjulikud.
Struktuurilised lahtikerimise funktsioonid
Transkriptsiooni ajal toimib RNA polümeraas iseseisva masinana, mis suudab DNA kaksikheeliksi ise lahti pakkida, et matriitsile ligi pääseda. DNA polümeraas sõltub rohkem valkude kompleksist, nõudes täpsemalt ensüümi helikaasilt vesiniksidemete lõhkumist ja replikatsioonikahvli avamist.
Substraadi spetsiifilisus
Ensüümid on kasutatavate ehitusplokkide suhtes väga selektiivsed. RNA polümeraas inkorporeerib ribonukleotiide, mis sisaldavad riboossuhkrut ja uratsiili alust. DNA polümeraas selekteerib spetsiifiliselt deoksüribonukleotiide, milles uratsiili asemel on deoksüriboossuhkur ja tümiin.
Plussid ja miinused
RNA polümeraas
Eelised
+Sõltumatu initsiatsioon
+Kiire transkriptsioon
+Sisemine DNA lahtiharutamine
+Mitmed RNA tüübid
Kinnitatud
−Kõrgem veamäär
−Puudub tugev korrektuur
−Madalam stabiilsus
−Mööduvad tooted
DNA polümeraas
Eelised
+Äärmine täpsus
+Tugev korrektuur
+Püsiv geneetiline säilitamine
+Kõrge töödeldavus
Kinnitatud
−Vajab kruntvärvi
−Vajab abistajaensüüme
−Aeglasem initsiatsioon
−Komplekssed parandusrajad
Tavalised eksiarvamused
Müüt
RNA polümeraas ja DNA polümeraas töötavad sama kiirusega.
Tõelisus
Enamikus organismides on DNA polümeraas oluliselt kiirem, liikudes bakterites umbes 1000 nukleotiidi sekundis, samas kui RNA polümeraasi keskmine kiirus on lähemal 40–80 nukleotiidile sekundis. See erinevus peegeldab terve genoomi replikatsiooni tohutut ulatust võrreldes spetsiifiliste geenide transkribeerimisega.
Müüt
Kõigis rakkudes on ainult ühte tüüpi RNA polümeraase.
Tõelisus
Kui bakteritel on tavaliselt üks mitme subühikuga RNA polümeraas, siis eukarüootidel on vähemalt kolm erinevat tüüpi. Iga eukarüootne RNA polümeraas on spetsialiseerunud erinevatele ülesannetele, näiteks ribosomaalse RNA, messenger-RNA või ülekande-RNA sünteesimisele.
Müüt
DNA polümeraas saab parandada ainult replikatsiooni ajal tekkivaid vigu.
Tõelisus
Rakkude eluea jooksul eksisteerivad mitmesugused spetsialiseerunud DNA polümeraasid, mille ainus ülesanne on parandada kahjustusi. Need ensüümid suudavad täita UV-valguse või keemilise kokkupuute tagajärjel tekkinud lünki, toimides peamisest replikatsioonitsüklist sõltumatult.
Müüt
RNA polümeraas toodab kaheahelalist RNA-d.
Tõelisus
RNA polümeraas loob üheahelalise molekuli, lugedes ainult ühte kahest DNA matriitsi ahelast. Kuigi osa RNA-sid saab enda peale tagasi voltida, moodustades lokaalseid kaheahelalisi struktuure, on peamiseks väljundiks üks polünukleotiidahel.
Sageli küsitud küsimused
Kas DNA polümeraas saab alustada uut ahelat ilma abita?
Ei, DNA polümeraas ei saa ise sünteesi alustada, kuna see vajab sissetuleva nukleotiidi kinnitamiseks eelnevalt olemasolevat 3'-OH rühma. Looduses loob ensüüm nimega primaas lühikese RNA praimeri, mis annab sellele alguspunktile. Kui praimer on paigas, saab DNA polümeraas hakata ahelat pikendama.
Milline ensüüm on täpsem ja miks?
DNA polümeraas on tunduvalt täpsem, veamääraga umbes 100 000 korda madalam kui RNA polümeraasil. See kõrge täpsus tuleneb selle 3' kuni 5' eksonukleaasi aktiivsusest, mis võimaldab tal "tagasi liikuda" ja valesti paardunud aluseid eemaldada. RNA polümeraasil see range korrektuur puudub, kuna mõned vigased RNA molekulid on vähem katastroofilised kui püsiv mutatsioon genoomis.
Kas RNA polümeraas vajab DNA avamiseks helikaasi?
Erinevalt DNA polümeraasist ei vaja RNA polümeraas DNA heeliksi avamiseks eraldi helikaasi ensüümi. Sellel on sisemine mehhanism, mis võimaldab tal geenis liikudes DNA matriitsi lahti harutada. See moodustab transkriptsioonimulli, mis liigub koos ensüümiga.
Mis juhtub, kui RNA polümeraas teeb vea?
Kui transkriptsiooni ajal tekib viga, on tulemuseks vigane RNA molekul ja potentsiaalselt mittefunktsionaalne valk. Kuna aga ühte geeni transkribeeritakse mitu korda, on rakul tavaliselt palju teisi korrektseid valgu koopiaid. Defektne RNA laguneb lõpuks, seega ei jää viga organismi geneetilise koodi püsivaks osaks.
Miks DNA polümeraas kasutab tümiini, samas kui RNA polümeraas kasutab uratsiili?
Tümiini kasutamine DNA-s on evolutsiooniline kaitse mutatsioonide vastu. Tsütosiin võib spontaanselt uratsiiliks deamineeruda; kui DNA kasutaks uratsiili looduslikult, ei suudaks rakk öelda, kas seal peaks olema uratsiili alus või on tegemist kahjustatud tsütosiiniga. Tümiini kasutamisega DNA-s saab rakk hõlpsalt tuvastada ja parandada mis tahes ilmuvat uratsiili, säilitades geneetilise terviklikkuse.
Millised on kolm eukarüootsete RNA polümeraaside tüüpi?
Eukarüootid kasutavad RNA polümeraas I-d enamiku ribosomaalse RNA (rRNA) sünteesimiseks, RNA polümeraas II-d messenger-RNA (mRNA) ja mõnede väikeste RNA-de sünteesimiseks ning RNA polümeraas III-d ülekande-RNA (tRNA) ja teiste väikeste struktuursete RNA-de sünteesimiseks. Iga ensüüm tunneb ära spetsiifilisi promootorjärjestusi ja vajab toimimiseks erinevaid transkriptsioonifaktoreid. See spetsialiseerumine võimaldab geeniekspressiooni keerukamat reguleerimist.
Kas RNA polümeraas saab liikuda mõlemas suunas?
Ei, nii RNA kui ka DNA polümeraasid on rangelt ühesuunalised, sünteesides uusi ahelaid ainult 5' kuni 3' suunas. See tähendab, et nad loevad matriitsahelat 3' kuni 5' suunas. See suunapiirang tuleneb reaktsiooni keemilisest mehhanismist, mis nõuab, et olemasoleva ahela 3' hüdroksüülrühm ründaks sissetuleva nukleotiidi fosfaatrühma.
Kas DNA polümeraas osaleb transkriptsioonis?
Ei, DNA polümeraas osaleb ainult DNA replikatsioonis ja DNA parandamises. See ei mängi rolli transkriptsiooniprotsessis, mis on RNA polümeraasi domeen. Need kaks ensüümi erinevad oma struktuuri ja võime poolest ära tunda DNA molekulil erinevaid start-signaale.
Kuidas need ensüümid teavad, kust alustada?
RNA polümeraas tuvastab spetsiifilised DNA järjestused, mida nimetatakse promootoriteks ja mis signaalivad geeni algust. DNA polümeraas aga alustab tegevust kindlates kohtades, mida nimetatakse replikatsiooni alguspunktideks. Samal ajal kui RNA polümeraas leiab oma alguspunkti transkriptsioonifaktorite abil, peab DNA polümeraas ootama, kuni primaas asetab replikatsiooniharule praimeri.
Millist ensüümi kasutatakse PCR-is (polümeraasi ahelreaktsioon)?
PCR kasutab DNA polümeraasi, täpsemalt termofiilsetest bakteritest pärinevat kuumakindlat versiooni nagu Taq polümeraas. See võimaldab ensüümil ellu jääda kõrgetel temperatuuridel, mis on vajalikud DNA ahelate denatureerimiseks tsüklilise protsessi käigus. RNA polümeraasi ei kasutata standardses PCR-is, kuigi seda kasutatakse teistes tehnikates, näiteks in vitro transkriptsioonis.
Otsus
Geeniekspressiooni ja valgusünteesi radade uurimisel tuleks fookusesse valida RNA polümeraas. Rakkude jagunemise mehhanismide, pärilikkuse ja pikaajalise geneetilise stabiilsuse analüüsimisel tuleks valida DNA polümeraas.